工作原理
组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator, t-PA)是由血管内皮细胞合成并分泌的一种丝氨酸蛋白酶。目前的研究表明,t-PA具有促进纤溶酶原转化为纤溶酶、使纤维蛋白降解而具有防治血栓病及血管移植术后血栓形成等作用; 但还具有诱导细胞外基质降解及胶原酶原激活为胶原酶、促使血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)的迁移与增殖。所提供的ELISA Kit是典型的夹心法酶联免疫吸附测定试剂盒(ELISA)。预先包被的抗体为多克隆抗体。检测相抗体也为多克隆抗体,经生物素(biotin)标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的。颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。
每套试剂盒中内容(96T)
材料 数量
标准品 2vial
预包被抗体的96孔板 96T ( 8×12)
生物素标记抗体 96T (1:100)
ABC(过氧化物酶标记亲和素) 96T (1:100)
样品稀释液 96T
抗体稀释液 96T
ABC稀释液 96T
TMB显色液A 96T
TMB显色液B 96T
TMB终止液 96T
ELISA洗涤液 96T(1:25)
需要而未提供的试剂和器材
1. 37℃恒温箱。
2. 标准规格酶标仪。
3. 自动洗板机。
4. 单通道或多通道可调节移液器以及其吸头。
5. 蒸馏水,容量瓶等
6. 干净的试管和Eppendof管。
注意事项
1. 开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
2. 配制各种试剂时,切记混匀!
3. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
4. 建议所有标准品、样本都做双份检测。
5. 要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活!
6. 为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。