ELISA试剂盒的技术要点包括三个方面：试剂的制备、反应条件的选择和操作的标准化。一、试剂的制备ELISA的主要试剂为固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下叙述这些试剂的原料和制备方法。
         （一）固相载体可作 ELISA试剂盒中载体的物质很多，zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能，抗体或蛋白质抗原吸附其上后保留原来的免疫活性。聚苯乙烯为塑料，可制成各种形式。
         （二）抗原和抗体在 ELISA试剂盒实施过程中，抗原和抗体的质量是实验是否成功的关键因素。本法要求所用抗原纯度高，抗体效价高、亲和力强。 ELISA试剂盒 所用抗原有三个来源：天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于动物组织或体液、微生物培养物等，一般含有多种抗原成分，需经纯化，提取出特定的抗原成分后才可应用，因此也称提纯抗原（purifiedantigen）。重组抗原（recombinantantigen）和多肽抗原（peptideantigen）均为人工合成品，使用安全，而且纯度高，干扰物质少。
        （三）免疫吸附剂固相的抗原或抗体称为免疫吸附剂。将抗原或抗体固相化的过程称为包被（coating）。由于载体的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（zui常用的为pH9.6的碳酸缓冲液）中，加于ELISA板孔中在4℃，经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低，ELISA试剂盒固相载体表面有能被此蛋白质*覆盖，其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，zui后产生非特异性显色而导致本底偏高。