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ELISA试剂盒实验时至关重要的步骤
更新时间:2024-01-11      阅读:400

ELISA试剂盒是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。虽然ELISA试剂盒的操作步骤看似简单,但没做到位的话就会影响实验的效果。所以ELISA试剂盒实验时至关重要的步骤有;

—、重要的洗涤;

不充分的洗涤会导致差异和高背景,从而带来不理想的实验结果。如果未结合的材料残留在微孔板中,那么它会增加背景噪音。有必要的话,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。

二、关键的封闭:

封闭液的作用是让不相关的蛋白占据微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。如果背景过高,怀疑封闭不充分,那么可以尝试使用更高浓度的封闭液,或适当延长封闭时间。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面试剂、吸附的抗原、抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。

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