样本处理的方法：

1. 融解RIPA裂解液，混匀。取恰当量的裂解液，在运用前数分钟内参加PMSF，使PMSF的终浓度为1mM。

2. 关于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(假如血清中的蛋白没有干扰，能够不洗)。依照6孔板每孔参加150-250微升裂解液的份额参加裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充沛触摸。一般裂解液触摸细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。

3. 充沛裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

关于安排样品：

1. 把安排剪切成细微的碎片。

2. 融解RIPA裂解液，混匀。取恰当量的裂解液，在运用前数分钟内参加PMSF，使PMSF的*终浓度为1mM。

3. 依照每20毫克安排参加150-250微升裂解液的份额参加裂解液。(假如裂解不充沛能够恰当添加更多的裂解液，假如需求高浓度的蛋白样品，能够恰当减少裂解液的用量。)

4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充沛裂解。

5. 充沛裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

6. 假如安排样品自身非常细微，能够恰当剪切后直接参加裂解液裂解，经过强烈vortex使样品裂解充沛。然后同样离心取上清，用于后续试验。直接裂解的长处是比较方便，不用运用匀浆器，缺陷是不如运用匀浆器那样裂解得比较充沛。