酶免疫技术是三大经典标记免疫技术之一,是以酶标记抗体或抗原为主要试剂的一种标记免疫分析技术。随着相关新技术的不断问世,如杂交瘤单克隆抗体技术(使各种对抗原决定簇高度特异的单克隆抗体可以在体外批量生产)、生物素-亲和素放大系统的应用以及与化学发光和电化学发光技术的偶联等,明显地提高民分析和测定方法的特异性、灵敏度及其自动化程度,使酶免疫技术不断更新,应用范围不断拓宽。当前,酶免疫技术已与形式各异、各具特点和用途的定位、定量和超微量测定的标记免疫分析技术融合发展,在医学和生物学中的应用日益广泛,是取代放射免疫技术的主要方法之一。 然而,近来许多客户向我们反映一些唯利是图的公司和小作坊,用假冒伪劣的ELISA试剂盒坑害广大的科研工作者,他们往往唯利是图,无视科学研究的严谨性和严肃性,让广大的科研工作者被动造假,严重扰乱了科研工作,严重扰乱了市场秩序,所以我们有义务,有责任揭露这些作伪造假者制作假冒伪劣ELISA试剂盒的手法,本期为您解析利用干扰实验即可辨别ELISA试剂盒是否检测目的抗原,方法如下:
(1)将针对试剂盒特异性的重组蛋白抗原和试剂盒中的检测抗体配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液
(2)37℃孵育15分钟后,代替原试剂盒中的检测抗体
(3)后续操作按照试剂盒说明书进行,加检测抗体、酶复合物和底物
(4)实验完毕后,检测其标准曲线,如果标准曲线良好则说明加入的目的抗原和试剂盒抗体不匹配,试剂盒检测抗体针对的是非目的抗原,该试剂盒为伪劣假造ELISA试剂盒。
(5)如果标准曲线无线性,则说明试剂盒检测抗体已被目的抗原中和或干扰,影响了其实际试剂盒抗体的检测作用,则该试剂盒检测抗体针对的是目的抗原。