ELISA试剂盒抗原抗体反响后直接测定形成的沉积或浊度,敏感度可达 5~10μg/ml,但在查验中,某些待测物在标本中的含量远低于这一水平,因而要寻觅添加敏感度的办法。符号的免疫测定是 将检测试剂中的抗原或抗体用可微量测定的物质加以符号,经过测定符号物来进步敏感度。在放射免疫测定和酶免疫测定中,符号物别离 为放射性核素和酶,zui后用测定放射性和酶生机来核算待检物的量,敏感度可比直接测定沉积物进步数百至数千倍。在符号免疫测定中, 一般参加过量的符号试剂以确保与待测物*反响。
ELISA试剂盒以符号抗体(Ab ※)检测抗原(Ag)为例,反响式如下: Ag+ Ab※→ AgAb>※+ Ab※在反响产物中有与Ag结合的Ab※和游离和Ab※ ,如不将两者分离而测定符号物,测得的成果将为两者之和。因而,游离符号物与结合符号物的分离是符号免疫测定中的重要过程。可采 用多种手段,固相载体是其中之一。如将抗原或抗体包被在固相载体上,ELISA试剂盒然后再与符号的抗原或抗体直接反响,结合的符号物被固定在载 体上,而游离的符号物留于溶液中。这样能够经过洗刷将游离的Ab ※除掉,结合符号物的测定可在固相上进行。