ELISA试剂盒具有活络、特异、简略、快速、安稳及易于自动化操作等特色。不只适用于临床标本的查看，并且因为一天之内能够查看几百乃至上千份标本,因而，也适合于血清流行病学调查。ELISA法是免疫确诊中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的流行症、寄生虫病及非流行症等方面的免疫确诊。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，依据现已运用的成果，本法不只能够用来测定抗体，并且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种前期确诊的杰出办法。因而ELISA试剂盒在生物医学各范畴的应用范围日益扩大，可概括四个方面：
1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
2、研讨抗酶抗体的组成。
3、显现微量的免疫沉淀反响。
4、定量检测体液中抗原或抗体成份。
 
操作流程如下：
（1）待测样品孔中每孔参加待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，参加纯细胞裂解液100μl。 （2）酶标板置4℃，包被。
（3）洗板：吸干孔内反响液，用洗刷液过洗一遍（将洗刷液注满板孔后，即甩去），之后将洗刷液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇摆。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗刷3-4次。
（4）阴性对照孔每孔参加PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔参加1：500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1：5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液 100μl，悄悄混匀10s，置37℃暗处反响15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反响。
（12）别离测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终究测得的OD值为两者之差（W1-W2），以削减由容器上的划痕或指印等形成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，核算S/N值。S/N≥2.1为阳性断定规范。
 
注：ELISA试剂盒所用溶液配方
(1) PBS：称取0.2g KH2P04, 2.9g Na2HP04?12H20、8.0g NaCl, 0.2g KCl，加双蒸水至1000ml。
（2）包被缓冲液：称取1.59g Na2CO3, 2.938 NaHCO3，加双蒸水至 1000m1。
（3）洗刷液(PBST)：含0.05% Tween-20的PBS。
（4）稀释液：含0.1%牛血清白蛋白(BSA)的PBS，首要用以稀释抗体、规范品、样品。
（5）TMB显色液：称取1.84g Na2HP04.12H20, 0.51 g柠檬酸，加双蒸水至1O0ml，配成柠檬酸-磷酸缓冲溶液。用10.5 ml 柠檬酸-磷酸缓冲溶液溶解1锭TMB，再参加35μl 3% H2O2
（6）细胞裂解液：1% TritonX-100，137mmol/L NaCl，20mmol/L Tris-HCl，2mmol/L EDTA，1mmol/L PMSF，pH 7.4。（其间PMSF溶于异丙醇中，配成1O mmo/L，-20℃ 储存备用。